产品货号:
YTC0821
中文名称:
3D培养细胞胰酶快速消化液
英文名称:
By3D Quick Trypsin-EDTA Solution
产品规格:
100mL
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本制品是一种经过优化测试的、含有胰酶和EDTA,pH值为7.2~7.8的用于3D细胞球的消化液。该消化液经过过滤除菌,可以直接用于3D培养细胞球的消化,或者一些组织的消化。
本制品使用方便,作用迅速。相较于普通型3D培养细胞胰酶消化液,本制品的作用更加迅速,通常室温消化细胞球2~3分钟左右,稍加吹打就可以将细胞球消化成单个细胞。3D细胞球消化成单个细胞需要的具体时间和细胞种类、细胞球球体大小及细胞球紧密度等密切相关,不同的细胞种类、接种数量数量及培养天数等培养条件下形成的3D细胞球消化成单个细胞需要的时间会存在一定的差别。
本制品对细胞的损伤小,消化得到的单细胞可以正常传代进行2D和3D培养。3D细胞球经本制品消化得到的单细胞,如果进一步进行2D培养可以以细胞的原本生长状态贴壁或悬浮在培养液中正常增殖;如果进一步进行3D培养可以正常形成细胞球。

| 组分 | 规格 |
| 3D培养细胞胰酶快速消化液 | 100mL |
| 说明书 | 1份 |
保存:2~8℃,有效期1年。

- 在使用By3D快速胰酶细胞消化液的过程中要特别注意避免消化液被细菌污染。
- 细胞球在外力的作用下容易变形或分散,吸去培养基、PBS洗涤等过程须轻缓,避免破坏或吹散3D细胞球。
- 尽管经测试本By3D快速胰酶细胞消化液对细胞的损伤较小,但为保证细胞的最佳活性和状态,可每作用1分钟小心吹打细胞球4~5次以促进细胞球的解离,并于显微镜下密切关注细胞球的解离状态,一旦细胞球解离成单个细胞,须及时终止消化。总之,消化细胞时间不宜过长,否则可能会影响细胞的后继生长状态。
- 由于3D细胞和2D细胞形态的差别,在胰酶细胞消化液的作用下3D细胞不会与2D细胞一样直接离散成单个细胞,通常会保持原有的形态,需要用移液器吹打将细胞球或细胞团打散以加速消化。

- 3D细胞的消化:
- 小心吸去培养液,用无菌PBS、HBSS或无血清培养液洗涤细胞球一次,以去除残余的血清。
- 3D细胞球通常沉淀在培养板或培养皿等的底部,而非牢固贴壁,肉眼观察通常为针尖大小、乳白色,在吸除培养液或洗涤细胞球的溶液时须尽量避开细胞球以免将细胞球吸走。培养板适当倾斜并对着光线时能看到乳白色的细胞球,须避开细胞球从液体边缘缓慢吸除液体。
- 加入少量本制品,略盖过细胞球即可,例如96孔板每孔加入约50μL,室温放置1~2分钟后吹打细胞球。
- 不同的细胞球消化时间有所不同,可以每作用1分钟后用量程合适的移液器吹打4~5次,以促进细胞球的消化。
- 在显微镜下观察,细胞球离散成数个大小不一的细胞团,并且随着胰酶作用时间的延长,吹打后细胞团逐渐减少并进一步分散,最终离散成单个细胞。
- 加入适量含血清的完全细胞培养液终止消化,适当摇晃混匀,即可直接用于后续实验,也可以继续进行步骤e离心除去胰酶细胞消化液后用于后继实验。
- 选做:将细胞悬浮液转入合适的离心管,1000~2000×g离心1分钟,沉淀细胞,尽量去除液体后,即可用于后续实验。
- 离心去除消化液可能会有少量细胞的损失。
- 小心吸去培养液,用无菌PBS、HBSS或无血清培养液洗涤细胞球一次,以去除残余的血清。
- 组织等的消化:
不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
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